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抗生素的介紹
點擊次數:1068 發布時間:2015-08-12
 

在細胞培養中常用的抗生素是青霉素(常用濃度是25~100ui/ml)與鏈霉素(25~100μg/ml)。這兩種抗生素;旌鲜褂。在一些實驗室里,它們常規加入所有的培養基中。慶大霉素(10~100μg/ml通常有廣譜抗菌效應,并具有溶液穩定性,故也被一些實驗室使用,特別是當有低水平的污染存在時更是這樣。以上這些試劑對霉菌與酵母菌的污染均無效。

盡管很多實驗室在細胞系的培養基中常規加入抗生素作繼代培養,但仍建議不要在原代培養中加入抗生素,其理由之一是獲得的細胞是無菌的,原代培養時的細菌污染很少發生。其次,盡管認為抗生素對細胞代謝的影響可忽略,但好避免使用它們,以免細胞生長環境的不穩定。重要的是要意識到培養中主要污染物的類型,它們通常暗示了問題的來源。

抗有絲分裂劑

某些DNA合成抑制劑對分裂細胞有毒,但對沒有DNA合成的細胞僅有輕微影響。由于神經元通常缺乏DNA合成能力,因此對抗有絲分裂劑沒有多大反應。這樣的試劑常常用于神經元的培養,以消除或減少非神經元群體。若要殺死所有的非神經元細胞,可以先加入血清或生長因子來保證有高比例的非神經元細胞進行DNA合成,此時再加入抗有絲分裂劑。但是,某些細胞在它的細胞周期的某些時相時對抗有絲分裂劑是不敏感的。不過,可以重復的將抗有絲分裂劑使用于增殖的細胞群體。在CNS神經元的培養中抗有絲分裂劑常常在星形細胞形成單層后加入,此時,星形細胞由于接觸抑制而終止了DNA的合成(即細胞停止增殖),它們不會因抗有絲分裂劑的加入而死亡。原代培養中用這種方法阻止成纖維細胞的過度增殖是十分必要的。有兩種抗有絲分裂劑常用于神經元的培養: Fluorodexyuridine,是胸苷合成酶抑制劑,一般使用濃度為~10μM。尿苷(10μM)也常使用,可阻止不分裂細胞的RNA合成。另外,阿糖胞苷也常被使用,其使用濃度為550μM。使用任何一種抗有絲分裂劑,都必須考慮它的神經原毒性,應該確定低效應的使用濃度。阿糖胞苷在很低的濃度下,也會對某些種類的神經元有毒性,可以造成特定神經原的死亡。其他的抗有絲分裂劑尚未表現出這種毒性。

 
 
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